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全长cDNA文库构建

我们供应下全长比例的文库构建服务,全长比例能够高达85%以上。

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一、一般全长cDNA文库构建

1. 服务流程

1.1  客户样品QC,Total RNA的提取。
1.2  mRNA的星散。
1.3  接纳CAP Trapper法停止全长mRNA的富集。
1.4  以mRNA为模板停止cDNA单链的分解。
1.5  对分解的cDNA单链停止分级纯化。
1.6  将分级纯化的cDNA取载体停止all-direct重组回响反映。
1.7  将重组产品转化DH10B感受态细胞。
1.8  cDNA文库的QC。
   a)  检测文库库容量。
   b) 每一个文库随机挑与32个克隆子,PCR检测检测均匀插入片断巨细,阳性率。
   c)  随机挑与24个克隆停止正向测序,经由过程NCBI的BLSTAX剖析全长率。

2.收样要求

   2.1  针对每一个文库,客户需供应最少能提取500ug总RNA的样本,大概最少500ug的总RNA。

3.发货内容

   3.1  我们供应构建好的cDNA文库的甘油菌液(露20%甘油的LB培养基),随机克隆子的PCR审定图谱,24个克隆正向测序讲演,文库构建讲演。

4.质量标准

   4.1  文库库容量:大于1*10^6 CFU。
   4.2  均匀插入片断:大于1.2Kbp。
   4.3   阳性率:大于95%。
   4.4   全长率:大于65%。
   4.5   我们构建的文库相对市场上的其他文库构建要领具有以下上风:
     1)我们从mRNA为模板间接停止cDNA单链的分解,没有经由任何扩增的历程,包管了文库的质量和忠厚性。
     2)运用了目前市场上下质量的反转录酶(Superscrip III),包管文库的片断长度。
     3)运用重组的要领,不经由任何的酶切历程,不消忧郁cDNA被割断而影响文库质量,重组效力较酶切衔接下许多,能够大大进步原始文库的库容量。

5.服务工夫

25个工作日内
 
二、下全长比例全长cDNA文库构建

1. 服务流程

1.1  客户样品QC,Total RNA的提取。
1.2  mRNA的星散。
1.3  运用特别的抗体停止全长mRNA的富集。
1.4  以mRNA为模板停止cDNA单链的分解。
1.5  对分解的cDNA单链停止分级纯化。
1.6  将分级纯化的cDNA取载体停止all-direct重组回响反映。
1.7  将重组产品转化DH10B感受态细胞。
1.8  cDNA文库的QC。
   a) 检测文库库容量。
   b) 每一个文库随机挑与32个克隆子,PCR检测检测均匀插入片断巨细,阳性率。
   c) 随机挑与24个克隆停止正向测序,经由过程NCBI的BLSTAX剖析全长率。

2.收样要求

   2.1  针对每一个文库,客户需供应最少能提取500ug总RNA的样本,大概最少500ug的总RNA。

3.发货内容

   3.1  我们供应构建好的cDNA文库的甘油菌液(露20%甘油的LB培养基),随机克隆子的PCR审定图谱,24个克隆正向测序讲演,文库构建讲演。

4.质量标准

   4.1  文库库容量:大于1*10^6 CFU。
   4.2  均匀插入片断:大于1.2Kbp。
   4.3  阳性率:大于95%。
   4.4  全长率:大于85%。
   4.5  我们构建的文库相对市场上的其他文库构建要领具有以下上风:
     1)我们从mRNA为模板间接停止cDNA单链的分解,没有经由任何扩增的历程,包管了文库的质量和忠厚性。
     2)运用了目前市场上下质量的反转录酶(Superscrip III),包管文库的片断长度。
     3)运用重组的要领,不经由任何的酶切历程,不消忧郁cDNA被割断而影响文库质量,重组效力较酶切衔接下许多,能够大大进步原始文库的库容量。

5.服务工夫

35个工作日内

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